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高效液相色谱仪常用的几种检测器

高效液相色谱仪常用的几种检测器

1、紫外-可见吸收检测器 它是高效液相色谱仪中使用最广泛的选择性检测器。它的作用原理是待测组分对特定波长的紫外或可见光有选择性吸收,适合于紫外或可见光区有吸收的溶质的测定。检测器输出信号的大小即吸光度与待测组分的浓度之间的关系服从朗伯比尔定律。紫外-可见吸收检测器的优点是具有很高的灵敏度;选择性好;对流量和温度的变化不敏感,适用于梯度淋洗;线性范围宽,能同时检测主要成分和痕量成分。缺点是只适用于检测能吸收紫外、可见光的物质,而且流动相的选择受到限制,要求流动相在测定波长下不能有吸收。


2、示差折光检测器 它是高效液相色谱中第二个广泛应用的通用型检测器,它的作用原理是连续地监测纯流动相和包含样品的流动相之间折射率的差值,只要纯流动相与待测组分的折射率不同,检测器就会给出检测信号,其响应信号的大小与样品含量呈正比,只要溶质和流动相的折射率有0.1的差异,就能检测到1mg/ml的溶质。原则上凡是与流动相折射率不同的待测物质都可用此检测器来测定,流动相与待测组分的折射率越大,检测器的灵敏度就越高。


3、荧光检测器 荧光检测器是高效液相色谱中应用较广泛的高灵敏度的选择性检测器。它的作用原理是:具有特殊结构的化合物受紫外光激发后,能发射出比吸收的紫外光波长较长的光,即荧光,在一定条件下,荧光强度与能产生荧光的物质浓度呈线性关系。用荧光灯检测很多发荧光的物质,某些不发荧光的物质可通过化学衍生技术,生成荧光衍生物,也可用荧光检测器进行检测。因此荧光检测器特别适用于芳香族化合物、生化物质的检测,如有机胺类、氨基酸、维生素、激素、酶等。


荧光检测器的优点是灵敏度极高,比紫外-可见吸收检测器高10~1000倍,特别适合于痕量分析;线性范围较宽,但比紫外吸收检测器的线性范围有窄;受外界影响小,可用于梯度淋洗。缺点是由于选择性检测器,应用范围受到限制;样品浓度较高,荧光强度与浓度不再呈线性关系;对影响荧光测量的一些干扰非常敏感。


4、电导检测器 电导检测器是一种选择性检测器,是离子色谱仪中应用最广泛的一种检测器。其工作原理是根据物质在某些介质中电离后产生的电导变化来测量电离物质的含量。


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