阻止移液错误破坏实验的 17 种方法

如果您在工作台上工作，准确的移液至关重要。如果没有准确的移液，您的实验将无法重现，您的储备溶液将不准确，并且您的分析会有如此大的误差，以致于对它们进行比较将毫无意义。但幸运的是，您无需担心——您信赖的精密微量移液器会为您处理好这些。

还是他们？

它们可能是精密仪器，但您的微量移液器的准确性取决于您。您需要维护您的移液器，了解它们的工作原理，并练习良好的技术。只有掌握了这些方面，您才能声称拥有诸如精密仪器之类的东西可供您使用。这是我们准确移液的万无一失的指南。

了解移液器的工作原理

1. 您最有可能使用空气置换移液器

空气置换移液器的工作原理有点像注射器，不同之处在于活塞和样品之间有一个充气垫。气垫可防止活塞与溶液接触。将溶液和移液管分开是好的，但它也对移液器施加了一些限制。

温度和压力会影响气垫的体积，从而影响移液精度。此外，挥发性溶剂会蒸发到气垫中，从而导致分配体积不准确且低于移液器上显示的体积。

空气置换移液器的桶也容易受到移液溶液的污染。如果您正在使用腐蚀性物质或生物危险材料，这可能是一个问题。

2. 不要使用空气置换移液器（取决于您的应用！）

本文中的大部分信息都与空气置换移液器有关，但有时容积式移液器可能是更好的选择。容积式移液器也像注射器一样工作，但它们没有气垫。这使得它们在移取挥发性溶剂时更加准确，因为溶剂没有蒸发的地方（气垫）。

没有气垫也减少了移取腐蚀性物质和生物危险材料时受到污染的机会，这使得正排量移液器更适合处理这些试剂。这些移液器价格昂贵，因为枪管和吸头是一个单元，移液时都需要更换。

一种更便宜的替代方法是使用带有屏障吸头的空气置换移液器，但这只能解决一些问题。

照顾好您的移液器

3. 每 6-12 个月维修一次移液器

这是一个粗略的指南；根据您对准确性的要求，您需要更频繁地对其进行维修。服务应包括重新校准、给运动部件加润滑脂以及更换任何磨损的密封件或其他部件。**由经验丰富的移液器医生完成此操作。

4. 每天检查移液器是否损坏

检查枪管的鼻子（安装尖端的地方）是否有任何明显的损坏。如果出现问题，请对其进行维修——因为它不太可能适合这项工作。

5. 每天使用前清洁移液器

应该用一些 70% 的乙醇擦拭移液器。

6. 使用移液器支架垂直存放移液器

以这种方式存放移液器可以防止移液器桶中的任何液体进入移液器内部并导致腐蚀。

7. 切勿将移液器放在吸头有液体的一侧

没有什么可以阻止液体滚落到移液管中（请记住，只有空气才能将液体与移液管分开）。移液管内的任何液体至少会导致污染，并可能导致严重的腐蚀损坏。

8. 使用合适的小贴士

在吸取和分配液体时，安装不当的吸头会导致空气逸出，从而导致结果不准确。

准确的移液依赖于良好的技术

9. 确保您知道如何正确移液

有关基础知识，请查看Gilson 的移液技术手册。要遵循的最重要的规则是：

• 移液器动作缓慢、平稳；

• 吸取液体时垂直握住移液器；

• 吸取液体时，仅将吸头稍微浸入 - 否则，您将在吸头上涂上液体，液体将随移液器内的体积一起转移；

• 分配液体时，垂直握住移液器，但使接收容器的侧壁保持 45 度角。移液器靠在侧壁上或移入已经存在的液体中。

10. 测试你的准确性

通过将 100 µL 分配到精细天平上来检查您的移液技术的准确性。您制作的液滴的质量应约为 0.1 克。现在做同样的事情 10 次并记录你获得的质量。如果变化超过 +/-0.5%，那么您要么需要重新评估您的移液技术，要么多加练习！

提高移液准确度的技巧

11. 预润湿移液器吸头

当您从移液器分液时，吸头上会留下一层液体，这使得分液量略小于移液器上显示的量。移液前预先润湿吸头将有助于提高准确度。

要预先润湿您的吸头，请将液体吸入移液器，然后将其分配回原来的容器中。涂层在尖端。现在，当您再次吸取液体并将其分配到接收容器中时，没有任何液体会留在吸头上并因润湿而流失。这仅推荐用于大于 10 µL 的体积。

12. 反向移液

在移取粘性液体或挥发性溶剂时使用此技术。当移液 0.5 µL 或更少的超微量样品时，反向移液也有帮助。将活塞向下推至吹扫位置（第二个停止位置），然后向上吸取液体。此时吸头中的液体过多。

但是，当通过将活塞推到吸液位置（**个停止位置）来分配液体时，多余的液体会留在吸头内。

使用这种方法，尖端是“自动”预润湿的。额外的液体在移取挥发性溶剂时也有帮助，因为一些溶剂会蒸发到气垫中。

13. 考虑环境温度

校准移液器的个人或公司可能是在室温下进行校准的。如果您在不同的温度下工作（例如在冷藏室），那么您的移液器将不会分配显示的体积。

14. 考虑样品温度

当重复移取冷样品时，**次分配的体积总是比预期的大，但随后用相同的吸头移液得到了正确的体积。热样品也是如此，只是**次分配的体积比预期的要小。

他们的解决方案很简单——为了准确移液，将**体积分装回原始容器，然后开始移液。

15. 使用灵敏的移液器来分配您想要分配的体积

随着分配体积接近移液器可以处理的最小值，移液器的准确度会降低。例如，如果您要分配 15 µL，那么 1 mL 移液器会很糟糕，200 µL 移液器不太好，而 20 µL 移液器是理想的。

16. 使用尽可能大的容量

大体积比小体积更容易准确移液。假设您正在执行一项必须吸取 5 µL 的检测。准确地移取这么少的量并不容易，并且可能会极大地导致结果中的统计误差。

另一方面，您可以将储备溶液稀释 10 倍，然后吸取 50 µL 溶液。您可以轻松准确地吸取这个量，这会产生更严格的误差线。

17. 最后，这是获得**精度的方法

分析天平比任何移液器都更准确。为获得**准确度，请使用移液器分配您需要的体积，但将其放入天平上的称重容器中。然后，根据质量计算实际移液体积（使用公式体积 = 质量/密度）。当然，这只适用于已知密度的溶液——但对于密度为 1 的水溶液，这不是问题